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主な違い
サザンブロッティングとウエスタンブロッティングの主な違いは、サザンブロッティングが特定のサンプル中の特定のDNAフラグメントを検出するために使用される手法であるのに対し、ウエスタンブロッティングは特定のサンプル中の特定のタンパク質を見つけるために使用されることです。
サザンブロッティング 対 ウェスタンブロッティング
ブロッティングは、科学者が混合物またはサンプルからさまざまな種類の分子を分離するために使用する手法です。この手法では、混合物中の核酸（DNAおよびRNA）やタンパク質などの高分子がゲルのスラブを移動します。ここでは、小さな粒子は大きな粒子よりも速く移動します。これらの分子は、固定化された膜の表面に押し付けられ、分子が膜に移動します。特定の物質の検出に基づいたさまざまなタイプのブロッティング、すなわち、サザンブロッティング、ノーザンブロッティング、およびウェスタンブロッティングがあります。サザンブロッティングは、DNAの検出に使用されるブロッティングの種類であり、ウェスタンブロッティングはタンパク質の検出に使用されます。サザンブロッティングは、1975年にEdward M. Southernによって開発されました。したがって、サザンブロッティングとして知られています。一方、ウエスタンブロッティングは、1979年にスタンフォード大学のジョージスタークのグループによって開発されました。この名前は、サザンブロッティングと一致するために使用されました。サザンブロッティングは特定のDNA配列を見つけるために使用されますが、ウェスタンブロッティングは特定のアミノ酸またはタンパク質配列を見つけるために使用されます。
比較表
| サザンブロッティング | ウェスタンブロッティング |
| 特定の混合物中の特定のDNA配列を見つけるために使用される手法は、サザンブロッティングとして知られています。 | 特定の混合物中のタンパク質の特定のアミノ酸配列を見つけるために使用される手法は、サザンブロッティングとして知られています。 |
| によって開発された | |
| サザンブロッティングは、1975年にEdward M. Southernによって開発されました。 | ウエスタンブロッティングは、1979年にスタンフォード大学のジョージスタークのグループによって開発されました。 |
| 検出の種類 | |
| サザンブロッティングは、特定のDNA配列を見つけるために使用されます。 | ウェスタンブロッティングは、特定のアミノ酸またはタンパク質配列を見つけるために使用されます。 |
| 原理 | |
| ハイブリダイゼーションの原理で機能します。 | 免疫検出法または抗原抗体相互作用の原理で機能します。 |
| 調査 | |
| 一本鎖DNAまたはRNAがプローブとして使用されます。 | 一次抗体と二次抗体がプローブとして使用されます。 |
| ゲル電気泳動 | |
| アガロースゲル電気泳動は、サザンブロッティングで使用されます。 | SDS PAGE /ウェスタンブロッティングでタンパク質を分離するために使用されるポリアクリルアミドゲル |
| ブロッティング手順 | |
| サザンブロッティングは、毛細管移動法に従って行われます。 | ウェスタンブロッティングは電気転写手順に従います。 |
| サンプル | |
| サザンブロッティング中に、サンプルを変性させる必要があります。 | ウェスタンブロッティング中、サンプルは本来の状態である必要があります。 |
| ブロッキング | |
| サザンブロッティングにはブロッキングのようなステップは含まれていません。 | ウェスタンブロッティング中、粉ミルクまたは牛血清アルブミン（BSA）の助けを借りて、ニトロセルロース紙上の非特異的抗体部位がブロックされます。 |
| ラベル付け方法 | |
| サザンブロッティングで使用される一般的な標識方法は、発色性色素または放射標識または蛍光標識などの使用です。 | ウェスタンブロッティングで使用される標識方法は、蛍光標識抗体または放射標識、発色性色素またはジアミノベンジジンの形成などの使用です。 |
| 検出方法 | |
| サザンブロッティングの検出方法として、光の検出、オートラジオグラフ、および色の変化が使用されます。 | ウエスタンブロッティングの検出方法は、色の変化と光の検出などです。 |
| 応用 | |
| サザンブロッティングは、DNA検出、父子鑑定、DNAフィンガーリング、犠牲者識別、犯罪者の識別、感染性病原体の発見、突然変異または遺伝子再配列の特定などに使用されます | ウエスタンブロッティングは、混合物中のタンパク質数の検出、血清中のHIV、ウイルス、細菌などの検出、欠陥タンパク質の検出、ヘルペス、B型肝炎、ライムの明確な測定に使用されます疾患、クロイツフェルト・ヤコブ病など。 |
サザンブロッティングとは?
サザンブロッティングは、エドウィンサザンによって与えられた最も古いブロッティング方法であり、サザンブロッティングと名付けられました。これは、特定のサンプルまたは混合物から特定のDNAシーケンスを見つけるために使用されます。サザンブロッティング中の手順は、電気泳動、転写、および特定の配列の検出です。まず、特定の制限酵素の助けを借りてDNAを断片化します。次に、目的のDNA断片をゲル電気泳動で分離します。これらのフラグメントは、2つのDNA鎖を分離するために、アルカリ溶液（NaOHなど）の助けを借りて変性されます。これらの一本鎖DNA断片は、ブロッティングのプロセスを経て膜に転写されます。次に、この膜結合DNAを標識プローブで処理します。このプローブは、オートラジオグラムなどで視覚化できる膜DNA上の相補鎖に付着します。
ウェスタンブロッティングとは?
ウェスタンブロット法は、スタンフォード大学のジョージ・スタークのグループによって発明されました。このグループは、タンパク質中の特定のアミノ酸配列を識別するために使用されます。タンパク質ブロットまたは免疫ブロットとしても知られています。ウェスタンブロッティング中のステップは、電気泳動、転写、および特定のタンパク質の検出です。まず、混合物を均質化します。次に、電気泳動を利用して目的の分子を分離します。これらの分子を膜に転写し、特定のプローブを使用して特定のタンパク質を特定します。
主な違い
- 特定の混合物中の特定のDNA配列を見つけるために使用される技術は、サザンブロッティングとして知られていますが、特定の混合物中のタンパク質の特定のアミノ酸配列を見つけるために使用される技術は、サザンブロッティングとして知られています。
- サザンブロッティングは、1975年にエドワードM.サザンによって開発されたため、サザンブロッティングとして知られています。一方、ウエスタンブロッティングは、1979年にスタンフォード大学のジョージスタークのグループによって開発されました。
- サザンブロッティングは、特定のDNA配列を見つけるために使用されます。逆に、特定のアミノ酸またはタンパク質配列を見つけるために、ウエスタンブロッティングが使用されます。
- サザンブロッティングは、裏返しのハイブリダイゼーションの原理で機能します。ウエスタンブロット法は、免疫検出法または抗原抗体相互作用の原理で機能します。
- 一本鎖DNAまたは場合によってはRNAが反対側のサザンブロッティングでプローブとして使用され、ウェスタンブロッティングでは一次および二次抗体がプローブとして使用されます。
- アガロースゲル電気泳動はサザンブロッティングで使用され、SDS PAGE /ポリアクリルアミドゲルはウェスタンブロッティングでタンパク質を分離するために使用されます。
- 一方、サザンブロッティングは、毛細血管移動手順に従います。ウェスタンブロッティングは電気転写手順に従います。
- サザンブロッティングでは、サンプルを変性する必要がありますが、ウェスタンブロッティングでは、サンプルは本来の状態である必要があります。
- フリップ側のサザンブロッティングにはブロッキングのようなステップは含まれません。ウェスタンブロッティングでは、粉乳または牛血清アルブミン（BSA）の助けを借りて、ニトロセルロース紙上の非特異的抗体部位がブロックされます。
- サザンブロッティングで使用される一般的な標識方法は、発色性色素または放射性標識または蛍光標識などの使用です。一方、ウェスタンブロッティングで使用される標識方法は、蛍光標識抗体または放射性標識の使用、発色性色素またはジアミノベンジジンの形成などです。
- 光の検出、オートラジオグラフ、および色の変化はサザンブロッティングの検出方法として使用されますが、ウェスタンブロッティングの検出方法は色の変化と光の検出などです。
- サザンブロット法は、DNA検出、父子鑑定、DNAフィンガーリング、犠牲者識別、犯罪者の識別、感染性病原体の発見、突然変異または遺伝子再配列の特定などに使用されます。逆に、ウエスタンブロット法は、混合物、血清中のHIV、ウイルス、細菌などの存在を検出し、欠陥タンパク質を見つけ、ヘルペス、B型肝炎、ライム病、クロイツフェルト・ヤコブ病などの明確な尺度として使用します。
結論
上記の議論は、サザンブロッティングがサンプル中の特定のDNAセグメントを見つけるために使用される最も古いブロッティング技術であり、ウェスタンブロッティングが後者で発見され、特定のアミノ酸配列または特定のタンパク質を識別するために使用されることを要約しています。
